La conduite de nuit est l'ensemble des règles particulières à appliquer lors de la conduite d'un véhicule dans l'obscurité, ou plus exactement quand la luminosité du jour diminue de façon significative, réduisant la vision du conducteur et des autres usagers de la route, ce qui impose au minimum l'usage des feux pour une conduite sécuritaire.
Les principales difficultés de ce mode de conduite sont dues à la diminution de la visibilité et la baisse de la vigilance (chronobiologie). Les conséquences sont une vision moins bonne des panneaux, des autres véhicules, des autres usagers, des usagers vulnérables, des piétons, des animaux, et des autres obstacles et d'importants risques d'éblouissement.